Bilirubinový prášek CAS 635-65-4se získává hlavně ze žluči. Bilirubin je nerozpustný ve vodě, rozpustný v organických rozpouštědlech, jako je benzen, chloroform a sirouhlík, a mírně rozpustný v ethanolu a etheru. Bilirubin lze také rozpustit v horké směsi ethanolu a chloroformu. Sodná sůl bilirubinu je snadno rozpustná ve vodě, ale jeho soli vápníku, hořčíku a barya jsou ve vodě nerozpustné. Bilirubin je monoklinický krystal se světle oranžovou nebo sytě červenohnědou barvou. Jeho suchá pevná látka je relativně stabilní a chloroformový roztok je také relativně stabilní ve tmě. Je nestabilní v alkalickém roztoku (jako je 0,1mmol/L hydroxid sodný) nebo při setkání s ionty trojmocného železa a rychle se oxiduje na biliverdin. Bilirubin se může vázat na glycin, alanin nebo histidin. Přidání sérového proteinu, vitamínů nebo EDTA může stabilizovat bilirubin.
1. Příprava vápenaté soli metodou nepřímé extrakce vápenaté soli: do čerstvé prasečí žluči za míchání přidejte 3-3,5krát supernatant nasycené vápenné vody a poté pokračujte v míchání po dobu 5-10min, Ph{ {4}}, odstraňte pěnu zahřátou na 50 stupňů pomocí gázy, pokračujte v zahřívání k varu, udržujte 2 minuty, ochlaďte, přefiltrujte a získejte vápenatou sůl. Příprava hotového produktu s bilirubinem: Vezměte vápenatou sůl a přidejte 0,8násobné množství vody, aby vznikla pasta, prosejte ji přes 30-40 síto, do filtrátu přidejte 0,3 % antioxidantu, přidejte sůl a kyselinu pro úpravu pH na 1,5 nechte 4 hodiny stát, přefiltrujte, přidejte do filtračního koláče 8-10násobek množství 80% etanolu, rozdrťte a dobře promíchejte, přidejte antioxidant, nechte stát přes noc a získáte sraženina. Přidejte 4-6násobek množství 80% nebo více etanolu a antioxidantu, zamíchejte a namočte přes noc. Tento proces opakujte 3-4krát a vysušte sraženinu pod 70 stupňů, abyste získali hotový bilirubinový produkt.
Srážení vápenaté soli [HCl, těžký siřičitan sodný] → srážení [etanol, těžký siřičitan sodný] → srážení [70 stupňů ] → produkt bilirubin.
2.Příprava bilirubinátu vápenatého metodou extrakce chloroformem: Čerstvá prasečí žluč se upraví na pH 12 hydroxidem sodným, zahřeje se k varu, přidá se roztok chloridu vápenatého, poté se zahřeje k varu, ochladí se, zfiltruje se za získání bilirubinátu vápenatého. Prasečí žluč [NaOH, CaCl2] → [pH 12, 100 stupňů ] Příprava bilirubinového prášku CAS 635-65-4 vápenatá sůl bilirubin hotový produkt: vápenatá sůl bilirubinu se upraví na pH 1-2 kyselinou chlorovodíkovou 1:1, kyselá voda se vypustí, chloroform se extrahuje chloroformem, promyje se bezvodým ethanolem a roztok se ponechá při teplotě asi 5 stupňů, aby se získal konečný produkt bilirubinu.
Vápenatá sůl bilirubinu [HCl] → [pH1-2] kyselá sloučenina [chloroform, bezvodý ethanol] → [5 stupňů ] bilirubin hotový výrobek
3. Vylepšená metoda vápenaté soli pro okyselení vápenatou solí: Vezměte čerstvou prasečí žluč a přidejte 1% hydroxid vápenatý, dobře promíchejte, rychle zahřejte na 90-97 stupeň, udržujte v teple po dobu 10 minuty a přefiltrujte, abyste získali vápenatá sůl. Zahřátí na 40 stupně způsobí vzhled mastnoty, kterou lze jemně odstranit. Získanou vápenatou sůl lze jednou omýt horkou vodou, aby se odstranily přebytečné alkálie a další nečistoty. Vezměte vápenatou sůl a přidejte více než 10násobné množství vody, aby se rovnoměrně rozptýlila. Přidejte 1% antioxidant a míchejte (60 ot./min.), aby se po kapkách přidala kyselina chlorovodíková v poměru 1:2. Do 40 minut dosáhněte pH 2,0 a počkejte, dokud se pH nezmění, abyste získali kyselou látku. Prasečí žluč [1% hydroxid vápenatý] → [90-97 stupeň , 15min] Vápenatá sůl žluči [antioxidant, kyselina chlorovodíková] → [pH2,40min] Kyselé alkoholové mytí, vodní mytí: Okyselený bilirubin je rovnoměrně rozptýlen při pokojové teplotě s 10násobným množstvím ethanolu, pH by nemělo být vyšší než 5, přidá se 0,5 % antioxidantu, promíchá se a nechá se asi 1 hodinu vrstvit. Přejděte do horní vrstvy lihového roztoku a seberte vysrážený bilirubin. Bilirubin promývejte 50° teplou vodou po dobu asi 5 minut, sbírejte plovoucí bilirubin, rychle přidejte ethanol pro dehydrataci a odstraňte ethanol, abyste získali surový bilirubin. Kyselá sloučenina [ethanol] → [1h] vysráží bilirubin [50 stupňů horká voda] → [ethanol] extrakce surového bilirubinu, odpaření, krystalizace a sušení: Vezměte surový bilirubin a přidejte 10krát chloroform, aby se třepal při 50 stupních po dobu 10 minut. V případě potřeby extrahujte 2-3krát a zbytek by měl být bílý. Chloroformový extrakt byl podroben vakuové destilaci téměř do sucha, což vedlo k vytvoření většiny krystalů bilirubinu. Po ochlazení na teplotu místnosti byl přidán ethanol a dále ochlazován na 4 stupně po dobu 10 minut. Krystaly bilirubinu byly odfiltrovány a ošetřeny bezvodým ethanolem nebo etherem, následovalo vakuové sušení, aby se získal vysoce kvalitní bilirubin.
Hrubý bilirubin [chloroform] → [10min] roztok chloroformu [krystalizace] → vysoce kvalitní bilirubin
4.Příprava hydrolyzačního roztoku metodou extrakce iontoměničovou pryskyřicí: Vezměte čerstvou kravskou žluč, přefiltrujte ji gázou, přidejte 2mol/l roztok hydroxidu sodného pro úpravu pH na 10 za míchání, povařte a přefiltrujte, abyste získali hydrolyzát.
Adsorpce a eluce žlučové kyseliny kolonou s hydrolyzačním roztokem pryskyřice: Převařený hydrolyzační roztok nalévejte do předehřáté kolony pryskyřice, dokud barva výtoku neztmavne a adsorpce není nasycená.
Přidávejte studenou vodu, dokud teplota uvnitř kolony neklesne na pokojovou teplotu, a poté přidejte zředěný roztok hydrogensiřičitanu sodného z horní části kolony tak, aby pH výtoku bylo 1.
Promyjte 75% ethanolem, shromážděte, když je eluentem tmavě zelený zakalený roztok, a promývejte, dokud se výtok nevyčeří a pH nebude téměř neutrální. Znovu promyjte 95% ethanolem.
Odeberte ethanolový eluční roztok pro přípravu žlučové kyseliny. Hydrolyzační roztok [iontoměničová kolona] → [75% ethanol, 95% ethanol] Ethanolový eluent pro eluci bilirubinu, koncentraci a sušení: Uvolněte všechen 95% ethanol z kolony, namočte do chloroformu po dobu 10 minut a sbírejte chloroformový eluční prostředek, dokud nebude žádný objeví se žlutá barva.
Chloroformový eluent se destiluje téměř do sucha, přidá se bezvodý ethanol a pokračuje se v regeneraci, dokud nezmizí žádný chloroform. Filtrujte za horka, shromážděte bilirubin, vysušte a získejte hotový bilirubinový produkt.
Yolanda
Mobil: +86 -29-86107037-8012
E-mail:sales9@konochemical.com
Tel/Wechat: 18729555803